
如何選擇您的膠原蛋白檢測(cè)試劑盒?
膠原蛋白是脊椎動(dòng)物體內(nèi)豐富的蛋白質(zhì),約占全身蛋白質(zhì)的30%。它們?cè)诮M織結(jié)構(gòu)中起著重要作用,并具有許多其他功能,如細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、組織修復(fù)和許多病理?xiàng)l件。
膠原蛋白是一個(gè)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白家族;在脊椎動(dòng)物中,至少鑒定出27種膠原類(lèi)型,具有42條不同的多肽鏈。I型、II型、III型、V型、XI型、XXIV型、XXVII型膠原是形成原纖維的膠原,含有三重螺旋結(jié)構(gòu),能夠捆綁成原纖維。
膠原的特點(diǎn)是存在穩(wěn)定膠原三螺旋所需的羥脯氨酸殘基。
一些膠原的組織分布有限,例如II、IX和XI型膠原幾乎只存在于軟骨中,IV型膠原的存在僅限于基底膜。I型、II型和III型膠原是組織中含量豐富的膠原。
雖然人體中存在超過(guò)3公斤的膠原蛋白,但膠原蛋白是一種難以純化和分析的分子。這部分是由于膠原蛋白分子通過(guò)不同類(lèi)型的交聯(lián)形成了廣泛的網(wǎng)絡(luò),這使得膠原蛋白分子不可溶且難以提取。
目前,對(duì)于膠原蛋白的分析,存在各種類(lèi)型的分析方法:
-ELISA檢測(cè)膠原特異性前體結(jié)構(gòu)域
-ELISA檢測(cè)特定類(lèi)型的膠原蛋白
-利用特異性膠原抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡
-組織切片天狼星紅染色
-基于天狼星紅的可溶性膠原蛋白分析
-樣品水解后羥脯氨酸殘留的測(cè)定(通過(guò)比色試劑盒或HPLC)。
QuickZyme Biosciences開(kāi)發(fā)了一套分析膠原蛋白的方法,無(wú)論是從任何物種和任何組織中可溶的還是不溶的。
QuickZyme Biosciences提供膠原蛋白分析
•QuickZyme可溶性膠原蛋白分析
•QuickZyme總膠原蛋白測(cè)定
•QuickZyme敏感組織膠原蛋白分析
•QuickZyme羥脯氨酸測(cè)定
•QuickZyme敏感組織羥脯氨酸測(cè)定
QuickZyme可溶性膠原蛋白測(cè)定
該分析可識(shí)別可溶性或(酸/胃蛋白酶)溶解的纖維狀膠原蛋白。
該分析為比色法,采用96孔板格式,基于膠原與天狼星紅(一種含磺酸基的陰離子染料)的沉淀。染料在高pH下從沉淀的絡(luò)合物中釋放,然后進(jìn)行比色檢測(cè)。對(duì)測(cè)定進(jìn)行了優(yōu)化,使其他蛋白質(zhì)(如白蛋白)不會(huì)干擾。明膠(變性膠原蛋白)不被該分析所識(shí)別。該試驗(yàn)需要可溶性或可溶性的原纖維膠原。
應(yīng)用:該方法用于測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)基中的可溶性膠原蛋白和細(xì)胞提取物中的可溶性膠原蛋白(酸或酸/胃蛋白酶)?;?yàn)不是膠原蛋白分析:哪種化驗(yàn)可以用于什么應(yīng)用?
建議用于組織,因?yàn)榇蠖鄶?shù)組織膠原蛋白是交聯(lián)的和不溶的。
QuickZyme總膠原蛋白測(cè)定
該分析可識(shí)別所有類(lèi)型的膠原蛋白(成熟、未成熟、前膠原、降解膠原蛋白、交聯(lián)膠原蛋白、各種來(lái)源和種類(lèi)的膠原蛋白)。
該分析為比色法,采用96孔板格式,并基于羥脯氨酸的定量,羥脯氨酸是氨基酸脯氨酸的一種改良版本,幾乎只存在于膠原蛋白中。含膠原蛋白樣品經(jīng)酸水解后,羥脯氨酸從膠原蛋白中釋放出來(lái)。水解在95℃下進(jìn)行,水解產(chǎn)物可直接用于羥脯氨酸分析,無(wú)需洗滌或干燥步驟。
應(yīng)用:該方法用于總膠原蛋白的定量。這包括所有前膠原、未折疊膠原、成熟膠原以及樣本中所有膠原類(lèi)型的膠原降解產(chǎn)物和明膠。由于第一步是樣品的*水解,提取膠原蛋白的困難不起作用。該分析適用于所有類(lèi)型
樣本,包括任何物種的組織。由于組織樣品中的未知物質(zhì),該分析受到基質(zhì)效應(yīng)的影響。在許多樣品中,可以通過(guò)稀釋水解物來(lái)防止這種影響。如果由于膠原蛋白濃度較低(例如在肝組織中),因此不需要充分稀釋水解物,我們建議使用敏感組織
膠原蛋白測(cè)定QuickZyme羥脯氨酸測(cè)定
該測(cè)定與總膠原蛋白測(cè)定相似,不同之處在于不包括膠原蛋白水解的方案和試管。
應(yīng)用:該分析與總膠原蛋白分析具有相同的應(yīng)用領(lǐng)域,但適用于有自己的水解方法或收集待分析水解樣品的客戶(hù)。
QuickZyme敏感組織膠原測(cè)定
該測(cè)定法與QuickZyme總膠原蛋白測(cè)定法非常相似,但不受基質(zhì)效應(yīng)的影響,因此是低膠原蛋白濃度和大量基質(zhì)效應(yīng)的肝組織等組織的測(cè)定法。
應(yīng)用:該測(cè)定法用于測(cè)定(組織)樣品中的總膠原蛋白,該樣品具有低濃度的膠原蛋白和基質(zhì)效應(yīng),需要在QuickZyme總膠原蛋白測(cè)定中稀釋
QuickZyme敏感組織羥脯氨酸測(cè)定
該試驗(yàn)與QuickZyme敏感組織膠原蛋白試驗(yàn)相似,不同之處在于不包括膠原蛋白水解的方案和管道。
應(yīng)用:該分析與QuickZyme敏感組織膠原蛋白分析具有相同的應(yīng)用領(lǐng)域,但適用于有自己的酸水解方法或收集待分析水解樣品的客戶(hù)。
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