上海起發(fā)genelink 26-4000-10說明書

Random Primers 5’ Phosphorylated

規(guī)格：50微克
運(yùn)輸條件：常溫

隨機(jī)引物5'磷酸化描述
隨機(jī)引物是代表該大小的所有可能序列的寡核苷酸的混合物。與使用六聚體（1,2）和cDNA合成類似，隨機(jī)引物可用于在低聚物標(biāo)記中引發(fā)合成。隨機(jī)引物標(biāo)記產(chǎn)生高比活性標(biāo)記DNA探針，可用于所有南方、北方和原位雜交研究。隨機(jī)的
引物也可以類似于在cDNA合成中使用六聚體與寡聚體d（T）組合來產(chǎn)生更多的5'端cDNA
序列
最近，隨機(jī)引物被用來檢測DNA多態(tài)性。這些多態(tài)性，簡單地被檢測為DNA的片段，從父母一方擴(kuò)增而不是從另一方擴(kuò)增，以孟德爾的方式遺傳，可用于構(gòu)建多種物種的遺傳圖譜。作者建議，這些多態(tài)性被稱為RAPD（發(fā)音快速）標(biāo)記，在隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA之后（3）。
重建
建議在無核糖核酸酶的DEPC處理水中以50µM的濃度進(jìn)行重組。
-短時間旋轉(zhuǎn)試管，將運(yùn)輸過程中可能卡在瓶蓋中的試管內(nèi)容物卸下。顆?？赡芊浅Ｐ?，不可見。

推薦用法
在20µl反應(yīng)體積中，使用4µl 50µM溶液中的1µg DNA或RNA作為模板。
詳見反應(yīng)條件。
質(zhì)量控制數(shù)據(jù)
使用逆轉(zhuǎn)錄酶和poly（A）+RNA作為模板，該產(chǎn)品被證明能夠引發(fā)第一鏈cDNA反應(yīng)，并且
使用klenow DNA聚合酶在隨機(jī)引物標(biāo)記反應(yīng)中進(jìn)行探針標(biāo)記。
功能分析條件
下面給出的條件已經(jīng)過測試，以產(chǎn)生第一鏈cDNA合成，并給出了一個例子。使用該產(chǎn)品的其他實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)使用了各種變體和其他方案，以產(chǎn)生出色的第一鏈合成。研究人員可以替代他們自己的反應(yīng)條件。
RNA的質(zhì)量對逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)非常重要。必須有完整的全長RNA作為模板材料，不含微量RNA酶和污染性化學(xué)物質(zhì)。低質(zhì)量的RNA模板通常是導(dǎo)致cDNA產(chǎn)物截短和不完整的原因。
按照下面給出的順序添加組件。反應(yīng)體積可以放大。