BlastR™裂解緩沖液

 BlastR™稀釋緩沖液

 BlastR™過(guò)濾器

 蛋白酶抑制劑雞尾酒

 HDAC抑制劑雞尾酒

 Precision Red™蛋白質(zhì)分析試劑

 乙酰賴氨酸親和珠

 IP控制珠

 BlastR™洗滌緩沖液

 旋轉(zhuǎn)列

 珠子洗脫緩沖液

 化學(xué)發(fā)光試劑A.

 化學(xué)發(fā)光試劑B.

 抗乙酰賴氨酸-HRP抗體

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒進(jìn)行免疫沉淀，與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)乙酰賴氨酸抗體和免疫組化乙酰賴氨酸親和珠相比較

圖1.各種乙?；?- 賴氨酸親和試劑用于來(lái)自Cos-7細(xì)胞的IP乙?；鞍踪|(zhì)，用TSA（1m M）和煙酰胺（1mM）處理（+）或未處理（ - ）6小時(shí)。（1）16.7 米 AAC04珠漿液（20升米克抗體）。（2）50 米 AAC04珠漿液（60升米克抗體）。（3）抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物（Cell Signaling，按制造商的說(shuō)明書1：100）。（4）乙酰ImmuneChem賴氨酸親和力珠（40 米克抗體）。（5）ImmunChem乙酰賴氨酸珠（80 米克抗體）。（6）正常小鼠IgG對(duì)照珠（60 米g抗體）。洗脫富集的乙酰化蛋白質(zhì)的總曲線，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP抗體（1：3000）分析。AAC04在富集廣泛的乙?；鞍踪|(zhì)方面表現(xiàn)出色，而其他商業(yè)乙酰賴氨酸富集試劑主要富集豐富的乙?；鞍踪|(zhì)（例如乙酰化微管蛋白和組蛋白）。

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒免疫沉淀靶特異性乙酰化蛋白

圖2A：使用BlastR緩沖液分離A431細(xì)胞，未處理（ - ）或用1m M TSA和1mM煙酰胺處理（+）6小時(shí)。使用AAC04珠（60m g）進(jìn)行IP 。通過(guò)SDS-PAGE分離總細(xì)胞裂解物（輸入）和免疫沉淀的樣品，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用針對(duì)EGFR的抗體（Millipore，1：1000），Hsp90（Abcam，1：20,000），P53（Sigma，1：2000）進(jìn)行分析，和RhoDGI（Millipore，1：1000）

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測(cè)試劑盒從肝臟和心臟組織中免疫沉淀乙酰化蛋白

圖2B：用BlastR緩沖液獲得小鼠組織提取物（肝臟和心臟）。使用AAC04珠（60，進(jìn)行IP 米 g）或mIgG對(duì)照珠（＃CIG02，60 米在組織提取物的1mg的克）。通過(guò)SDS-PAGE分離富集的蛋白質(zhì)，并通過(guò)蛋白質(zhì)印跡用AAC03-HRP（1：3000）分析。