HTI 凝血因子Xa

haemtech Coagulation Factor Xa

因子Xa在凝血酶原
酶中的參與說明了絲氨酸蛋白酶因子Xa在凝血酶原酶復(fù)合物中的參與。膜結(jié)合因子Xa與膜結(jié)合因子Va結(jié)合以形成凝血酶原酶復(fù)合物。該復(fù)合物通過蛋白水解除去凝血酶原的片段1.2（F1.2）部分，有效地將酶原凝血酶原（II）轉(zhuǎn)化為活性絲氨酸蛋白酶凝血酶（IIa）。

HCXA-0060

HCBXA-0061 

HCXA-GD Human gla-Domainless Factor Xa

HCXA-EGR

HCXA-DEGR 

HCXA-BEGR

BCXA-1060

BCXA-EGR 

 BCXA-DEGR

MCXA-5060 鼠標(biāo)因子Xa

通過內(nèi)在或外在因子Xase復(fù)合物激活酶原因子X產(chǎn)生活性絲氨酸蛋白酶因子Xa（1,2）。因子X的活化需要重鏈的蛋白水解切割，導(dǎo)致活化糖肽的釋放。因子Xa中的重鏈區(qū)含有絲氨酸蛋白酶催化結(jié)構(gòu)域，而如酶原中的輕鏈含有膜結(jié)合結(jié)構(gòu)域。

因子Xa參與凝血酶原酶復(fù)合物，其催化凝血酶原快速轉(zhuǎn)化為凝血酶。凝血酶原酶是由在血漿存在下組裝在細(xì)胞表面上的因子Xa（酶）和因子Va（輔因子）組成的酶復(fù)合物。盡管因子Xa可以獨(dú)立地催化凝血酶原的活化，但是在*組裝凝血酶原酶復(fù)合物的情況下，該反應(yīng)發(fā)生的速率增加了近300,000倍。在解體凝血酶原酶復(fù)合物后，通過輔因子的失活，因子Va或通過抑制劑如ATIII直接抑制因子Xa來終止因子Xa在體內(nèi)的凝固活性。

近年來，分子生物學(xué)家利用因子Xa對細(xì)菌中表達(dá)的融合蛋白進(jìn)行位點(diǎn)特異性切割（9-12）。將Xa因子敏感位點(diǎn)摻入目標(biāo)重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用因子Xa切割，從表達(dá)的雜交種中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去因子Xa。

因子Xa通過用從羅素的毒蛇毒液中分離的因子X活化劑活化純化的因子X來制備。通過在苯甲脒 - 瓊脂糖上的色譜法從活化混合物中純化因子Xa，然后進(jìn)行凝膠過濾（1,3）。還可獲得幾種因子Xa的修飾形式，包括：A）含有三肽氯甲基酮抑制劑EGRck或熒光抑制劑Dansyl-EGRck的活性位點(diǎn)阻斷因子Xa; 和B）人Gla-domainlessβ-因子Xa。該酶以50％（體積/體積）甘油/ H2O供應(yīng)，應(yīng)儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析測定純度，并在因子Xa凝固測定和/或顯色底物測定中測量活性。

除了其在凝血研究中的廣泛應(yīng)用之外，因子Xa還可用于融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割。將因子Xa敏感位點(diǎn)摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用因子Xa切割，從表達(dá)的雜交種中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去因子Xa。批次一致性確保每次都可重現(xiàn)的結(jié)果。對于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，請與我們聯(lián)系，討論用于細(xì)胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。

參考

1. Jesty，J.，et al。，Methods Enzymol。，45,95（1976）。

2. 杰克遜，CM，安。Rev.Biochem。，49,765（1980）。

3. Krishnaswamy，S.，et al。，J.Biol。Chem。，262,3291（1987）。

4. Discipio，RG等，Biochemistry，16,5253（1977）。

5. Fujikawa，K。和Davie，EW，Methods Enzymol。，45,89（1976）。

6. Krishnaswamy，S.，et al。，J.Biol。Chem。，261,8997（1986）。

7. Discipio，RG等，Biochemistry，16,698（1977）。

8. Jackson，CM等，Biochemistry，7,4506（1968）。

9. Fujikawa，K.，Biochemistry，13,5290（1974）。

10. Nagai，K。，et al。，Proc。國家科?？茖W(xué)院?？茖W(xué)。USA，82,7252（1985）。

11. Aurell，L.，et al。，Thromb。Res。，11,595（1984）。

12. Nagai，K。和Thogersen，H.，Nature，309,810（1984）。

樣本出版物

1. Monteiro，S.，Biochem。J.（2005）387,871-877。（凝血酶原激活）

2. Zhang，D.，et al。，Biochemistry。2006年11月28日; 45（47）：14175-14182。（凝血酶原激活）

3. K. Garai等人。/ Protein Expression and Purification 66（2009）107-112（融合蛋白的切割）

4. Kamata，K。，et al。，Proc。國家科?？茖W(xué)院?？茖W(xué)。美國，卷。95，pp.6630-6635，1998年6月（結(jié)晶）

5. Yang，Y。等，J Immunol。2006年12月1日; 177（11）：8219-8225。（用作ELISA中的捕獲）

6. Krisinger。，等，Journal Biol Chem。（2009）VOL。284，沒有。9，pp.5896-5904（表面等離子體共振分析）

HTI中國代理, HTI上海代理， HTI北京代理，HTI廣東代理， HTI江蘇代理HTI湖北代理,HTI天津代理, HTI黑龍江代理, HTI內(nèi)蒙古代理, HTI吉林代理, HTI福建代理,  HTI江蘇代理, HTI浙江代理,  HTI四川代理,

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購服務(wù)商

1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。

2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營超過700多個品牌，基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。

3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。

4：富有競爭力的價格優(yōu)勢，絕大部分價格有優(yōu)勢。

5：多年積累良好的信譽(yù)，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等藥企。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā)，歡迎合作。