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Haematologic HCPC-0070說明書

發(fā)布時間:2018/10/16      點擊次數(shù):1366

Haematologic HCPC-0070說明書

HTI HCPC-0070

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCPC-0070說明書

蛋白質(zhì)C.  Protein C

 

 

 

蛋白質(zhì)C
的結(jié)構(gòu)域表示蛋白質(zhì)C的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區(qū)域,AP =在酶原轉(zhuǎn)化為釋放后釋放的活化肽?;钚越z氨酸蛋白酶,催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。箭頭表示在酶原激活期間被凝血酶蛋白水解切割的位點。

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 HCPC-0070 人體蛋白C

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決定

通過顯色測定法<0.5%aPC活性

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

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 BCPC-1070 牛蛋白C

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

通過顯色測定法<0.5%aPC活性

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

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維生素K依賴性酶原蛋白C在肝臟中作為單鏈多肽合成,隨后通過從前體分子中去除二肽(Lys-146和Arg-147)轉(zhuǎn)化為二硫鍵連接的異二聚體(1) ,2)。在血漿中觀察到痕量的單鏈形式。負(fù)責(zé)蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結(jié)合的輕鏈含有11個γ-羧基谷氨酸(gla)殘基,1b-羥基天冬氨酸殘基和2個表皮生長因子(EGF)同源結(jié)構(gòu)域。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體位于重鏈中。人蛋白C易于從重鏈的COOH末端蛋白水解切割肽(Mr = 3000),產(chǎn)生稱為β-蛋白C的改變形式。沒有觀察到α-和β-蛋白C之間的功能區(qū)別。在人蛋白C的重鏈Arg-12(牛的Arg-14)中的單個切割將酶原轉(zhuǎn)化為絲氨酸蛋白酶,活化的蛋白C.這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面之間的復(fù)合物催化。蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白。與其他維生素K依賴性凝血因子相反,活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反,活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。這種切割由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反,活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復(fù)合物而促成纖維蛋白溶解反應(yīng)。

如Haley等人所述,通過修改Walker程序(3),從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛蛋白C. (4)。使用免疫親和層析(5)和常規(guī)技術(shù)(4,9)的組合,從新鮮冷凍的檸檬酸化人血漿制備人蛋白C. 蛋白質(zhì)C以50%(體積/體積)甘油/ H2O提供,應(yīng)儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用基于顯色底物的測定法測量活性。

 

 

加載

人類蛋白質(zhì)C,每個泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

 

本土化

等離子體

血漿濃度

4-5μg/ ml(人)(6)
5-10μg/ ml(牛)(2)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶活化蛋白C(APC)的前體

分子量

62,000(人類)(7)
58,000(牛)(7)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 14.5(人類)(7)

 

 

= 13.7(牛)(7)

 

等電點

4.4-4.8(人類)(8)
4.2-4.5(牛)(8)

結(jié)構(gòu)體

兩條鏈,Mr = 41,000和21,000,二硫鍵連接,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

23%(人類)(7)
14%(牛)(7)

翻譯后修改

十一個gla殘留物(牛),九個gla殘基(人),一個β-羥基天冬氨酸

 

 

  • 1. Esmon,CT,Thromb進展。和Hemosts。,10,25(1984)。
  • Stenflo,J.,Semin。在Thromb。和Hemostas。,10,109(1984)。
  • Walker,F(xiàn)J,et al。,Biochim。生物物理學(xué)。Acta,571,333(1979)。
  • Haley,PE,et al。,J.Biol。Chem。,264,16303(1989)。
  • Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
  • Griffen,JH,et al。,Blood,60,261(1982)。
  • Kisiel,W.,et al。,Methods Enzymol。,80,320(1981)。
  • Discipio,RG等,Biochemistry,18,899(1979)。
  • Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,11,397(1981)。

 

 

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1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

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