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Haematologic HCVII-0030說明書

發(fā)布時(shí)間:2018/10/15      點(diǎn)擊次數(shù):1115

Haematologic HCVII-0030說明書

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊(cè)公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCVII-0030說明書

HTI HCVII-0030

Human Coagulation Factor VII

 

人凝血因子VII

 

 

人因子VII
的結(jié)構(gòu)域表示人因子VII的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =含有與人表皮生長(zhǎng)因子同源的序列的區(qū)域,催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。因子Xa切割因子VII以形成因子VIIa的位點(diǎn)用箭頭表示。

Human Coagulation Factor VII

  • HCVII-0030 Human Factor VII

本土化

等離子體

血漿濃度

0.5μg/ ml(2) - (基于活動(dòng)測(cè)量)

行動(dòng)方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子VIIa的前體

分子量

50,000(2)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.9

 

等電點(diǎn)

4.8-5.1(6) - (基于對(duì)牛因子VII的分析)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,NH2-末端gla-結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

13%(7) - (基于對(duì)牛因子VII的分析)

翻譯后修改

一個(gè)β-羥基天冬氨酸(8),十個(gè)玻璃殘留物(9)

  •  

尺寸

20微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲(chǔ)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動(dòng)決定

凝血試驗(yàn)

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

  •  

人因子VII是單鏈,維生素K依賴性血漿糖蛋白,其在肝臟中合成(1-3)。在分泌到血液中之前,通過維生素K依賴性羧化酶的翻譯后修飾產(chǎn)生位于分子的NH 2末端部分的十羧基谷氨酸(gla)殘基,其促進(jìn)細(xì)胞膜結(jié)合。在凝血過程中,因子VII被蛋白水解活化成絲氨酸蛋白酶VIIa因子。因子VII可以被凝血酶,因子IXa,因子Xa或因子XIIa激活?;罨瘜?dǎo)致精氨酸-152的COOH-末端側(cè)上的單鏈分子裂解,產(chǎn)生NH2-末端衍生的輕鏈(Mr = 20,000)和COOH-末端衍生的重鏈(Mr = 30,000),其保留通過單個(gè)二硫鍵共價(jià)結(jié)合。輕鏈區(qū)含有g(shù)la結(jié)構(gòu)域,以及與人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)同源的兩個(gè)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。因子VII中鑒定的單一β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)。因子VIIa的重鏈區(qū)含有催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔因子組織因子可以以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 以及與人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)同源的兩個(gè)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。因子VII中鑒定的單一β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)。因子VIIa的重鏈區(qū)含有催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔因子組織因子可以以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 以及與人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)同源的兩個(gè)生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。因子VII中鑒定的單一β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)。因子VIIa的重鏈區(qū)含有催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔因子組織因子可以以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 因子VII中鑒定的單一β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)。因子VIIa的重鏈區(qū)含有催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔因子組織因子可以以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 因子VII中鑒定的單一β-羥基天冬氨酸也位于輕鏈區(qū)。因子VIIa的重鏈區(qū)含有催化結(jié)構(gòu)域。因子VIIa和輔因子組織因子可以以鈣依賴性方式結(jié)合在帶負(fù)電荷的細(xì)胞表面上,以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 可以以鈣依賴性方式在帶負(fù)電的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 可以以鈣依賴性方式在帶負(fù)電的細(xì)胞表面上結(jié)合以形成外在因子Xase酶復(fù)合物。該酶復(fù)合物催化因子IX轉(zhuǎn)化為因子IXa和因子X轉(zhuǎn)化為因子Xa。分離出因子VII的cDNA并測(cè)定核苷酸序列(4)。因子VII與其他絲氨酸蛋白酶具有廣泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C.

使用常規(guī)技術(shù)(2)和免疫親和色譜(5)的組合純化人因子VII。純化的蛋白質(zhì)以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC。通過SDS-PAGE分析測(cè)定純度,并在因子VII凝固測(cè)定中測(cè)量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子VII,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

血漿濃度

0.5μg/ ml(2) - (基于活動(dòng)測(cè)量)

行動(dòng)方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子VIIa的前體

分子量

50,000(2)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.9

 

等電點(diǎn)

4.8-5.1(6) - (基于對(duì)牛因子VII的分析)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,NH2-末端gla-結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

13%(7) - (基于對(duì)牛因子VII的分析)

翻譯后修改

一個(gè)β-羥基天冬氨酸(8),十個(gè)玻璃殘留物(9)

 

 

 

 

 

 

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