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              ALZET滲透壓泵 MODEL2002中文說明書

ALZET滲透壓泵是一種小型、可植入式的膠囊，可應(yīng)用于小鼠、大鼠及其他實驗動物研究。該滲透壓泵無需進行外部連接或頻繁處理，就能以恒定的速率持續(xù)給藥一天到六周的時間。
LOT NO. 10212-08
平均泵出速率 0.51 μl/HR
標(biāo)準(zhǔn)差 0.02 μl/HR
平均灌注體積 244.6 μl
標(biāo)準(zhǔn)差 6.0 μl
一、ALZET滲透壓泵MODEL2002基本描述
A. 性能（37℃） 泵送率0.5 μl/hr （± 0.1 μl/hr）, 持續(xù)時間: 14天, 膠囊容量 200μl
B. 組件:1.灌注管（filling tube）2.流量調(diào)節(jié)器（flow moderator）3.膠囊（pump body materials）
二、ALZET滲透壓泵 MODEL2002使用注意點
1.ALZET滲透壓泵不可重復(fù)使用
2.滲透壓泵必須被溶液充滿灌注量
3.溶解藥物的溶劑需與滲透壓泵材料相兼容
4.在實驗過程中藥物在溶劑中要保持穩(wěn)定
5.藥物的質(zhì)量輸出速率用方程式ko = Q • Cd 計算，ko為藥物的質(zhì)量輸出速率（g/hr），Q是膠囊中溶液的體積輸出（μl/hr），Cd為物濃度 （μg/l）
6.在對滲透壓泵進行灌注，操作以及手術(shù)植入過程中要確保無菌
7.如果要想滲透壓泵立刻起作用，或者滲透壓泵中灌注的是粘性溶液，或者如果附加一根導(dǎo)管，那么滲透壓泵在無菌的37°C生理鹽水中至少孵育4-6小時（是隔夜）。
8.如果滲透壓泵使用的環(huán)境與正常的哺乳動物的體溫以及滲透壓顯著不同時，滲透壓泵的泵送率可能會受到影響。
9. 滲透壓泵在給藥完成后或植入21天內(nèi)需取出，如超時，滲透壓泵附近組織內(nèi)的水分會進入膠囊，導(dǎo)致局部組織隆起，并處于高鹽狀態(tài)，對機體組織產(chǎn)生傷害。
10.通過與導(dǎo)管連接，ALZET滲透壓泵可向動靜脈循環(huán)，大腦、器官、內(nèi)腔等持續(xù)提供藥物。
11.在實驗過程中通過監(jiān)測血藥濃度可以驗證滲透壓泵實驗的正確性，同時通過查看試驗完成后滲透壓泵中藥物的剩余量，以及進行體外實驗等也可驗證。
三、ALZET滲透壓泵灌注方法 & 步驟:
藥物充滿膠囊很重要，正確的灌注方法下面已經(jīng)給出。
滲透壓泵中有氣泡或者不能正確將流量調(diào)節(jié)器插入膠囊將會導(dǎo)致不可預(yù)測的藥物泵送率波動。
在灌注和植入過程中應(yīng)戴手套；另外大量的油脂如果在皮膚表面聚積，可能會影響滲透壓泵性能；如果滲透壓泵被污染了，應(yīng)用70%的異丙醇擦拭，切忌不能用異丙醇浸泡；注意要在常溫下灌注藥物。
1：稱重空滲透壓泵以及它的流量調(diào)節(jié)器（總重）
2：利用27式灌裝管以及1mL的注射器灌裝滲透壓泵。若使用較大注射器，由于灌裝速度過快，可能會在膠囊中產(chǎn)生氣泡。用注射器抽取藥物溶液，裝上灌裝管。需要注意的是注射器和與其連接的灌裝管之間不能有氣泡。
3：拔掉流量調(diào)節(jié)器，將滲透壓泵直立，從滲透壓泵頂部的小開口插入灌流管，直到不能再插入為止。此時灌流管的接近膠囊的底部。
4：保持滲透壓泵直立，緩慢推注射器的活塞。當(dāng)藥物溶液到達膠囊頂部小開口處停止灌注，小心移去灌注管（速度快了可能會產(chǎn)生氣泡）。
5：檫掉溢出的藥物溶液，插入流量調(diào)節(jié)器直到白色帽子到達滲透壓泵頂部為止。插入的流量調(diào)節(jié)器將會取代部分已經(jīng)灌注到滲透壓泵中的藥物溶液，溢出的溶液需要擦干凈。確保該裝置正常運行，需要將流量調(diào)節(jié)器全部插進滲透壓泵中。
6： 稱量灌滿后的滲透壓泵（連同流量調(diào)節(jié)器），步驟6和步驟1的差值為灌注的藥物溶液的凈重。對于大多數(shù)稀釋的水溶液，重量（mg）=體積（μl）。灌注的體 積應(yīng)該大于平均灌注體積（Mean Fill Volume）的90%，即244.6*0.9=220.41。如果是這樣的話，灌裝后的滲透壓泵就可以使用了，如果不滿足以上條件，說明滲透壓泵中含有 氣泡，不能使用。 如果在灌注過程中阻力較大，可在灌注過程中將灌注管小角度翹起，灌注的小孔可通過來回移動灌注管而擴大，或者在插入灌注管之前多次插入及拔出流量調(diào)節(jié)器以 達到擴大灌注孔的目的。
四、藥物溶液如何配制及與滲透壓泵的兼容性, 滲透壓泵與水，稀釋的酸，堿溶液以及與稀釋的或低濃度的DMSO，酒精兼容，也與100%丙烯和聚乙二醇兼容。
ALZET滲透壓泵與脂肪族，芳香烴類化合物不兼容，例如庚烷，甲苯，動植物油脂。使用不兼容的溶劑可能導(dǎo)致滲透壓泵喪失功能。
下表提供了一些與滲透壓泵兼容的常用的已知溶劑。
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PH值大于1.8的酸 1-甲基-2-吡咯烷酮，在水中達12.5%
PH小于14的堿 聚乙二醇 300或400，溶于水或純
聚氧乙烯蓖麻油，在水中濃度達到25% 丙二醇或溶于水
培養(yǎng)基（1%的苯甲醇用于抑制細菌生長） 林格式溶液（包含或不包含乳酸鹽）
葡萄糖，在水中或NaCl中達5% 0.9%生理鹽水
二甲基甲酰胺，在水中濃度達到25% 血清（大鼠，小鼠）
DMSO，在水中或聚乙二醇中濃度達50% Solutol，在水中達30%
DMSO，在水中或乙醇（<=15%）中達50% 甘油醋酸酯，在水中達5%
乙醇，在水中濃度達到15% Tween 80，濃度達2%
甘油 蒸餾水
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注意，以上溶劑只是與滲透壓泵材料相兼容，實際操作過程中，還要注意是否與組織或體液兼容。
溶液在滲透壓泵中產(chǎn)生氣泡可能會影響藥物的泵送率，溶液中如果含有一些沉淀的不溶顆粒時需要過濾后使用，ALZET泵能夠泵出均質(zhì)的粘性溶液（粘度小于100000厘泊），懸浮液如果不沉淀也能被泵出。為了確保泵出速率的一致性，在持續(xù)泵出過程中懸浮液需保持均質(zhì)。
五、ALZET滲透壓泵體內(nèi)植入手術(shù)
ALZET 滲透壓泵可被植入動物皮下，動物重至少20g。首先在肩胛骨間的皮膚處切一小口，然后用止血鉗將皮膚和皮下結(jié)締組織分開，形成一個小的袋。將滲透壓泵插 入，流量調(diào)節(jié)器朝里，皮膚開口可縫合或者用夾子夾住。 ALZET滲透壓泵可被植入動物腹部，動物重至少150g。首先在動物胸腔下面皮膚開一個中線小口，然后在皮膚下的腹部肌肉處開一個小口，將滲透壓泵流量 調(diào)節(jié)器朝內(nèi)插入腹部。肌肉開口用線縫合，皮膚開口可用線縫合也可用夾子夾住。
六、ALZET滲透壓泵的檢測
ALZET滲透壓泵是精密的給 藥工具，泵送率和灌注體積已經(jīng)給出，滲透壓泵在4-6小時時間啟動后，給藥速率趨于恒定，直到剩余5%的藥物時，泵送率迅速下降，直到0為止。 DURECT方法是在37℃（± 0.5℃）下， 0.9%的生理鹽水中離體測量泵送率， 這種方法具有較好的可重復(fù)性。
A. 離體質(zhì)量檢測 選取20個相同型號滲透壓泵作為隨機樣本，滲透壓泵中充滿染液。充滿后，膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水（37℃）中，每隔一定時間將膠囊轉(zhuǎn)移到含有新鮮生 理鹽水的試管中，直到第14天，對滲透壓泵中泵出染料進行標(biāo)準(zhǔn)分析。在4-336h過程中， 每個滲透壓泵都以恒定速率泵出染料。 通過DURECT實驗， 每個滲透壓泵的時間依賴泵送率變量系數(shù)小于10%，均值的標(biāo)準(zhǔn)誤為5%。
B. 啟動時間 如果滲透壓泵在室溫下灌注，浸沒到等滲的生理鹽水（37℃），泵送率在幾小時內(nèi)不會達到穩(wěn)定。如果實驗要求立即給藥，DURECT建議將未灌注藥物的滲透 壓泵浸沒在0.9%的生理鹽水中4-6小時（隔夜37℃），如果與導(dǎo)管相連或者灌注粘性藥物時，以上步驟必須進行。
C.藥物持續(xù)泵送的驗證 藥物持續(xù)泵送可通過方程D = （V/Q） （.95）驗證，D是持續(xù)時間，V是規(guī)格書中給出 的滲透壓泵送容量體積（μl），Q是泵送率（μl/hr）。
七、驗證ALZET滲透壓泵的準(zhǔn)確性
為 了驗證實驗結(jié)果是否來自持續(xù)給藥，DURECT建議ALZET滲透壓泵使用者在實驗過程中的幾個時間點檢測血液藥物水平。注意不能將zui后滲透壓泵中剩余空 間作為泵出的藥物量，因為在實驗過程中，滲透壓泵會吸收水分，同樣，切開一個用完的滲透壓泵來驗證其性能也是不可靠的。
A.確定平均泵送率 : ALZET滲透壓泵的容量體積稍微大于14天泵出的溶液量。zui后，會有一些藥物溶液殘留在滲透壓泵內(nèi)，可用灌注管和1ml的注射器吸走。用額外的溶劑沖洗 滲透壓泵，對剩余藥物溶液進行分析，算出殘余藥物量。平均泵送率=（起始藥物量-殘余藥物量）/運行時間。
B.確定離體實驗泵送率 ALZET滲透壓泵給出的體積泵送率是在等滲的生理鹽水（37℃）中測定的，用戶發(fā)現(xiàn)檢測泵送率是必需的。
DURECT給出了以下步驟：
1：準(zhǔn)備一種能溶于生理鹽水的已知濃度溶液作為指示劑。泵出的指示劑的量作為計算泵送率的基礎(chǔ)。指示劑必需與滲透壓泵相兼容，同時還容易在等滲的生理鹽水中進行分析。
2：根據(jù)第三部分的方法將指示劑溶液灌注到滲透壓泵中。
3：將滲透壓泵放進一只裝有15ml等滲生理鹽水的20ml試管中，在37℃中進行預(yù)孵育，用塞子塞住試管，以防蒸發(fā)。
4：記錄孵育的開始時間。
5：大約每隔24小時，將滲透壓泵轉(zhuǎn)移到一只新的裝有15ml等滲的生理鹽水中去，記錄轉(zhuǎn)移的時間或者兩次轉(zhuǎn)移間隔的時間。
6：重復(fù)步驟 5約14天。
7：分析每只試管內(nèi)的指示劑的濃度，以確定每個時間段內(nèi)泵出的指示劑的量。指示劑的量處以時間間隔（小時），即為泵送率。

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