repligen 9333-1蛋白A ELISA試劑盒說明書

MabSelect SuRe™ ELISA Kit Performance Summary

引言

蛋白A ELISA試劑盒（目錄號9333-1）用于檢測和定量殘留的MabSelect SuRe™ 配體。我們的蛋白A檢測ELISA試劑盒是為那些需要高靈敏度檢測以測量少量污染MabSelect SuRe的客戶開發(fā)的™ 抗體產物中的配體。污染測試發(fā)生在開發(fā)和商業(yè)制造的幾個不同階段，可能包括：

特定條件下樹脂浸出特性的工藝開發(fā)

制造，通常從純化過程中的幾個點采集的洗脫樣品

完成產品發(fā)布，以記錄過程控制水平和批次間一致性

以下總結報告包含在存在人免疫球蛋白G（hIgG）的情況下，從蛋白A ELISA試劑盒的評估中收集的性能數(shù)據(jù)。此處提供的數(shù)據(jù)證明了蛋白A ELISA試劑盒：

檢測MabSelect SuRe的能力™ 在PBS-T緩沖液中存在高達0.5mg/ml hIgG的配體

回收率（準確度）、批間和批內精密度、定量限和檢測限

結果摘要

MabSelect SuRe公司™ 在hIgG存在下

當檢測MabSelect SuRe時，評估蛋白A ELISA試劑盒的性能™ 與不含hIgG的標準相比，在hIgG存在下。所有加標樣品的最終hIgG濃度為0.125mg/ml（在最終稀釋到測定板中之后）。每個樣品以8個重復制備，并根據(jù)試劑盒的標準方案進行三次單獨的ELISA。

數(shù)據(jù)處理

將標準曲線數(shù)據(jù)點擬合到4參數(shù)擬合分析中。該方程允許反向計算樣品rPA濃度和LoQ值。回收率計算如下：

定量限值（LoQ）

根據(jù)標準曲線測定的LoQ計算為0.025ng/ml。MabSelect SuRe的LOQ™ 在存在hIgG的情況下，配體加標樣品為0.115ng/ml或0.920ng/mg（0.92ppm）。根據(jù)該數(shù)據(jù)設置檢測MabSelect SuRe時試劑盒的靈敏度™ 在存在免疫球蛋白的情況下，配體的濃度小于百萬分之一（ppm）。

稀釋線性度

計算說明

精度（%CV）

通過確定rPA加標樣品數(shù)據(jù)點之間的標準偏差并除以平均值來計算精度。根據(jù)“工業(yè)指南：生物分析方法驗證"文本，精度應在15%以內。

分析內精密度

通過平均所有測定的%CV值，計算每個rPA加標樣品濃度的測定內精密度。

分析間精密度

通過測定三次測定的計算結果之間的標準差，然后除以平均值，計算每個濃度點的測定間精密度。

定量限（LoQ）

定量限（LoQ）定義為0 ng/ml樣品標準偏差的10倍。將0 ng/ml OD值的標準偏差乘以10，然后加到基礎0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標準曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoQ。對于每個試劑盒，在存在hIgG的情況下，rPA加標樣品的LoQ報告為每毫升緩沖液中的ng蛋白A（ng/ml）和每毫克hIgG中的ng蛋白質A（ppm）。

檢測限（LoD）

檢測限（LoD）定義為0 ng/ml蛋白A標準偏差的3倍

樣品將0 ng/ml OD值的標準偏差乘以3，然后加到基礎0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標準曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoD。對于每個試劑盒，LoD報告為每毫升（ng/ml）緩沖液中的ng蛋白a和百萬分之一（ppm）。

精確

準確度描述為與理論加標濃度相比，通過測定確定的回收率%。

MabSelect ™, MabSelect SuRe公司™ 和SuRe™ 是GE Healthcare的注冊商標。