貨號：003760

品名：sliceGolgi Kit （sliceGolgi試劑盒）

產(chǎn)品特點：

在自由浮動切片/切片上進行高爾基染色 

Bioenno  也在銷售sliceGolgi  試劑盒，并增加  了  固色劑 套裝。該  sliceGolgi 套件的設計上運行的片/段高爾基染色。浸漬和染色可以在自由浮動部分（50?400微米厚度）上進行。額外的   固色劑套裝使用Bioenno的醛來處理額外的樣品。  

該試劑盒已經(jīng)在來自大鼠和小鼠的許多類型的腦切片中進行了廣泛的測試，它們是：

• 新鮮切片，例如使用組織切碎機快速制備的急性切片。

• 器官切片培養(yǎng)物，  例如培養(yǎng)的海馬切片和培養(yǎng)的皮層切片。

• 已經(jīng)完成電生理記錄和/或藥物施用的人造腦脊液（ACSF） - 切片。

• 用Bioenno醛  固定劑（產(chǎn)品目錄號：003780）通過灌注或浸泡固定大腦的切片。固定的大腦可以在室溫（RT，15至25攝氏度）下在50?400微米處系統(tǒng)切片，并且切片可以單獨進行高爾基染色，單獨的免疫組織化學/免疫細胞化學（ICC）或組合的高爾基染色和ICC 。

• 額外的固色劑 套件允許處理更多的樣品。Bioenno建議購買固定試劑盒的sliceGolgi試劑盒。

所述  sliceGolgi套件 可以被施加到視網(wǎng)膜，脊髓，和培養(yǎng)的細胞以染色神經(jīng)元過程。

所述sliceGolgi套件產(chǎn)生樹突和棘（參見圖）的兩個可靠和高質(zhì)量的標記。神經(jīng)元浸漬在50至200微米厚的切片中  超快，僅在某些情況下2-3天。一般來說，浸漬時間取決于部件的年齡和厚度，需要4-7天。該試劑盒可儲存在15-25ºC的黑暗環(huán)境中長達12個月。

高爾基染色和免疫組化/免疫細胞化學（ICC）  

Bioenno Tech已經(jīng)成功地將sliceGolgi試劑盒與ICC一起用于同一腦部分（見圖4-9）。為了執(zhí)行組合的高爾基染色和ICC，固定切片首先經(jīng)歷高爾基染色，然后進行ICC：

（1）組織處理：將  動物心臟灌注生理鹽水，然后灌注由Bioenno Tech開發(fā)的  固定劑 （目錄號：003780）。將大腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome或類似類型的切片機/顯微鏡在RT下將腦部切成50?100微米厚。切片以0.1M PB（pH 7.4）收集并可以在緩沖液中儲存長達一周（4℃）。

固定切片可用于單獨的高爾基染色，單獨的ICC，以及組合的高爾基染色和ICC。

（2）  高爾基染色：  在RT（15-25℃）使用sliceGolgi試劑盒 對自由浮動切片進行高爾基染色  。神經(jīng)元的浸潤可能需要2-5天。

（3）  ICC：  自由浮動部分可以采用標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物（ABC）方法。通過在含有H 2 O 2的3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中孵育切片可以使免疫反應產(chǎn)物可視化。

注：  該  sliceGolgi套件 不適用于冷凍組織工作。切割前固定的組織塊不能冷凍。

產(chǎn)品功能

• 適用于切片/切片組織（厚度為50至400微米）
• 對自由浮動部分進行浸漬和染色
• 新型醛  固定劑 和增強浸漬液
• 神經(jīng)元的浸潤很快（2-7天）
• 結(jié)合高爾基體染色和免疫組織化學
• 經(jīng)過驗證的結(jié)果/用戶友好
• 足夠多達  1000個腦區(qū) （50-400微米厚，尺寸約1×1.5厘米）
• 用于體外實驗室使用
• 專門的
• 12個月保修

使用sliceGolgi試劑盒證明的結(jié)果 （產(chǎn)品目錄號：003760）

• 經(jīng)過驗證的結(jié)果使用sliceGolgi套件 

樹枝狀分支和刺已經(jīng)可靠地浸漬并用切片凝膠試劑盒染色。 

圖1 - 額皮質(zhì)層II中浸漬并染色的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬和染色神經(jīng)元中一日齡12（P12）C57BL小鼠的額皮質(zhì)。200微米厚的切片中的神經(jīng)元的樹突棘（箭頭）標記良好。箭頭表示絲狀偽足突起，未成熟的刺。圖像是使用20x物鏡拍攝的。

圖2 - 新皮層第三層錐體神經(jīng)元的樹枝狀分支

使用sliceGolgi試劑盒 浸漬和染色位于20×物鏡的額頂皮質(zhì)運動區(qū)域的錐體神經(jīng)元的斜樹突和主枝（莖）。C57BL小鼠12天齡。

圖3 - 下丘腦外側(cè)的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬自由浮動的條件下在100微米厚的切片的神經(jīng)元。從P12 C57BL小鼠的外側(cè)下丘腦區(qū)域采集具有軸突終端的染色的神經(jīng)元（20x物鏡）。在樹枝狀分支上發(fā)現(xiàn)許多絲狀偽足樣突起（箭頭）。

圖4 - 聯(lián)合使用sliceGolgi試劑盒和免疫組織化學/免疫細胞化學（ICC）

高爾基染色和ICC的組合允許同時觀察樹突棘和免疫反應產(chǎn)物。通常，自由浮動部分首先被處理用于高爾基染色，然后用于ICC。對于高爾基染色，通過升主動脈用0.9％鹽水溶液灌注動物，然后用新制備的固定劑（目錄號：003780，Bioenno Tech）灌注。將腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome以50-100μm厚度切割腦，并將切片收集到0.1M PB（pH 7.4）中的組織培養(yǎng)孔中。該sliceGolgi套件（目錄號：003760）浸漬（2-5天，RT）并染色樹突（黑色）。為了執(zhí)行ICC，將自由浮動切片進行標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物（ABC）方法。通過將切片在含有0.01％H 2 O 2的 0.04％3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中溫育8-10分鐘來使免疫反應產(chǎn)物可視化。使用4x物鏡從2個月大的C57小鼠的海馬中取得圖像。

圖5 - 在同一腦切片上進行的高爾基染色和ICC

結(jié)合的高爾基染色和ICC：1）C57小鼠心臟灌注生理鹽水，然后用Bioenno開發(fā)的醛固定劑 （目錄號：003780）。2）使用sliceGolgi試劑盒對自由浮動切片（50微米）進行高爾基染色。浸漬時間僅在22±1℃時為2天。3）使用標準的抗生物素蛋白 - 生物素復合物方法處理小白蛋白（PV）的ICC。單克隆小鼠抗PV抗體（1：20,000，MAB1572，Chemicon）的溫育時間在22±1℃過夜。使用4x物鏡從丘腦攝取圖像。

圖6。- 樹枝狀分支和PV-免疫陽性神經(jīng)元

高爾基染色和ICC在相同的腦部分進行。使用sliceGolgi試劑盒在自由浮動部分（100μm）上進行高爾基染色。浸漬時間為22±1℃3天。從4個月大的C57小鼠的下臂拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖7 - 高爾基染色的樹突和免疫標記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色皮層神經(jīng)元的樹枝狀分支在皮層的層III。免疫反應性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。從4個月大的C57小鼠拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖8 - 高爾基染色的皮層神經(jīng)元和免疫標記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色神經(jīng)元的樹枝狀分支在皮質(zhì)的更深的層。僅在22±1℃時，100μm厚切片中神經(jīng)元的浸潤需要2天。免疫反應性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。該圖像是使用20x物鏡從2個月大的C57小鼠拍攝的。

圖9 - 在相同的腦切片上進行高爾基染色和ICC

該sliceGolgi套件來標記樹突分支。以20x物鏡顯示的頂部面板中的盒裝區(qū)域被放大（63x）以突出樹突棘（箭頭）和免疫標記的神經(jīng)元（箭頭）。這些圖像取自2月齡C57BL小鼠的額頂皮層（體感區(qū)域）。

產(chǎn)品信息：

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