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貨號：L6060L
產(chǎn)品描述：
使用NAD +作為輔因子，Taq DNA連接酶催化在含有相鄰5'-磷?；?'-羥基末端的雙鏈DNA中形成磷酸二酯鍵。
規(guī)格： | 20,000 U |
濃度： | 40,000 U/ml |
保存： | -25°C至-15°C |
純度（SDS-PAGE） | > 99％ |
活性： | 400,000 U/mg |
SS核酸外切酶 | 400 U <5.0% released |
DS核酸外切酶 | 400 U <1.0% released |
DS內(nèi)切核酸酶 | 400 U = No conversion |
大腸桿菌 DNA污染 | 400 U <10 copies |
蛋白質(zhì)來源
重組大腸桿菌菌株攜帶Taq DNA連接酶基因的克隆。
提供：
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.1% Tween-20
50% glycerol
pH 7.5 @ 25°C
隨附：
B6060 (10X Taq DNA Ligase Buffer)
10X Taq DNA Ligase Buffer (B6060)：
200 mM Tris-HCI
250 mM KCl
100 mM MgCl2
5 mM NAD
0.1% Triton X-100
pH 7.6 @ 25°C
單位定義
1單位定義為在50μl1X Taq DNA連接酶緩沖液中10分鐘后加入1μg用Sma I和Sal I切割的Lambda DNA的12個堿基粘性末端的50％所需的Taq DNA連接酶的量在45℃孵育。
質(zhì)量控制分析
單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X Taq DNA連接酶反應緩沖液中進行酶批次的稀釋并加入到50μL含有λHind III消化的DNA和1X Taq DNA連接酶反應緩沖液的反應中。將反應在45℃孵育10分鐘，停止，并在用溴化乙錠染色的0.8％瓊脂糖凝膠上分析。
SDS-Page（物理純度評估）
將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上，該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標記和2.0μL的1：100稀釋的相同酶物種。電泳后，將凝膠染色并比較樣品以確定物理純度。該測試的驗收標準要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量，確認濃縮樣品的純度大于99％。
污染測試
單鏈核酸外切酶活性
將含有10,000cpm放射性標記的單鏈DNA底物的50μL反應液和10μL在37℃下孵育4小時的酶溶液導致TCA可溶性計數(shù)的釋放小于5.0％。
雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μl反應液在37℃下溫育4小時，導致TCA可溶性計數(shù)的釋放少于1.0％。
雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpENZuC DNA和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時，結(jié)果通過瓊脂糖凝膠電泳測定沒有肉眼可察覺地轉(zhuǎn)變?yōu)閹锌诘沫h(huán)狀DNA。
大腸桿菌 16S rDNA污染測試
重復5μL酶溶液樣品變性，并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA，使用對應于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標準是由3個重復的無模板對照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計數(shù)（C t）?；跓o模板對照 Ct值和標準曲線數(shù)據(jù)之間的相關性，該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。
部分產(chǎn)品信息：
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 濃度 | 品牌 |
|---|---|---|---|---|
N2070-10-L | ATP Solution | 50 µmol | 10 mM | Enzymatics |
N2050-10-L | 10 mM dNTP Solution Mix | 100 µmol | 10 mM | Enzymatics |
N2010L | 100 mM 75µmol dNTP Solution Set | 75 µmol | 100 mM | Enzymatics |
N2010-A-L | 100 mM dATP Solution | 75 µmol | 100 mM | Enzymatics |
N2050L | 100µmol dNTP Solution Mix | 100 µmol | 25 mM | Enzymatics |
Y9180L | 10x Uracil Cleavage System | 750 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7670 | 2x HiFi PCR Master Mix | 1 rxn | 2x | Enzymatics |
Y9420L | 5x ER/A-Tailing Enzyme Mix | 24 reactions | N/A | Enzymatics |
Y9380L | E. coli Pyrophosphatase | 50 U | 100 U/mL | Enzymatics |
Y9030L | E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein | 1.5 mg | 2.75 mg/ml | Enzymatics |
Y9140-HC-L | End-Repair Mix (High Concentration) | 75 Reactions | 1 Rxn/µL | Enzymatics |
Y9140-LC-L | End-Repair Mix (Low Concentration) | 200 Reactions | 1 Rxn/µL | Enzymatics |
Y9080L | Endonuclease VIII | 10,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
P7600L | EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) | 10,000 U | 200,000 U/mL | Enzymatics |
X8010L | Exonuclease I | 30,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
X8020L | Exonuclease III | 50,000 U | 100,000 U/ml | Enzymatics |
P7010-HC-L | Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) | 10,000 U | 50,000 U/ml | Enzymatics |
P7010-LC-L | Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7060L | Klenow Fragment | 2,500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
X8030L | Lambda Exonuclease | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7040L | M-MuLV Reverse Transcriptase | 100,000 U | 200,000 U/ml | Enzymatics |
P7090L | Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) | 3,000 U | 30,000 U/ml | Enzymatics |
P7140-HC-L | Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) | 100,000 U | 400,000 U/ml | Enzymatics |
P7140-LC-L | Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) | 100,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
P7610L | NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions | 250 Reactions | 2X | Enzymatics |
P7590L | Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase | 500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7460L | Poly(A) Polymerase | 1,000 U | 5,000 U/mL | Enzymatics |
Y9260L | RecA | 1.5 mg | 2.0 mg/mL | Enzymatics |
Y9220L | RNAse H | 5,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
Y9240L | RNAse Inhibitor | 20,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
L6010L | T3 DNA Ligase | 900,000 U | 3,000,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-LC-L | T4 DNA Ligase | 150,000 U | 120,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-HC-L | T4 DNA Ligase (Rapid) | 240,000 U | 600,000 U/ml | Enzymatics |
P7080L | T4 DNA Polymerase | 2,000 U | 3,000 U/ml | Enzymatics |
Y9130L | T4 Gene 32 Protein | 1.0 mg | 10 mg/mL | Enzymatics |
Y9040L | T4 Polynucleotide Kinase | 10,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
L6050L | T4 RNA Ligase 1 | 10,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
L6080L | T4 RNA Ligase 2 | 4,500 U | 30,000 U/ml | Enzymatics |
L6070L | T4 RNA Ligase 2 Truncated | 500 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
L6020L | T7 DNA Ligase | 900,000 U | 3,000,000 U/ml | Enzymatics |
P7260L | T7 DNA Polymerase | 3,500 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
P7180L | T7 RNA Polymerase | 50,000 U | 50,000 U/ml | Enzymatics |
L6060L | Taq DNA Ligase | 20,000 U | 40,000 U/ml | Enzymatics |
P7110L | Taq DSC 2.0 DNA Polymerase | 1,250 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7250L | Taq-B DNA Polymerase | 10,000 U | 5,000 U/ml | Enzymatics |
P7620L | TaqIT | 5,000 U | 50,000 U/mL | Enzymatics |
P7070L | Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) | 6,000 U | 20,000 U/ml | Enzymatics |
G5020L | Thermolabile UDG | 500 U | 1,000 U/ml | Enzymatics |
Y9370L | Thermostable Pyrophosphatase | 1,250 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
G5010L | Uracil DNA Glycosylase | 10,000 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
P7511L | VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase | 500 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
P7520L | VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase | 500 U | 2,000 U/ml | Enzymatics |
L6030-W-L | WGS Ligase | 24 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7640L | ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit | 1000 Reactions | N/A | Enzymatics |
P7020-HC-L | φ29 DNA Polymerase (High Concentration) | 2,000 U | 100,000 U/ml | Enzymatics |
P7020-LC-L | φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) | 2,000 U | 10,000 U/ml | Enzymatics |
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